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打造高品质国产无血清细胞培养品牌,从源头处为细胞治疗领域构建稳固基石。

无血清细胞冻存液

通用细胞冻存液

产品用途

支持高密度冻存间充质干细胞、免疫细胞、单个核细胞、杂交瘤等多细胞系。双重冷冻保护剂配方,细胞复苏活率与回收率稳定在90%以上。产品成分明确,特别适合于细胞药物申报企业。
产品视频

产品名称

产品货号
产品规格
用途
无血清细胞冻存液NC1001.1
100mL/瓶用于细胞的长时间冻存


细胞冻存密度

细胞系名称传统血清冻存液友康无血清冻存液

推荐冻存密度

(cells/mL)

单个核细胞50%90%0.1~3.0x107
间充质干细胞80%95%0.1~2.5x107
NK/CIK80%95%0.1~3.0x107
MDCK90%95%0.1~3.0x107
杂交瘤细胞80%90%0.1~3.0x107

用途与描述


1、无血清细胞冻存液用于免疫细胞及干细胞的存储。
2、细胞保藏中心,无血清细胞冻存液用于细胞株的长期保存。
3、科研高校,无血清细胞冻存液用于细胞株冻存。
4、无血清细胞冻存液用于医院样本库细胞样本保存。


支持高密度冻存MSC细胞(1-2x107 cells/mL),为常规血清冻存液的10倍。


无血清细胞冻存液,含多种保护剂成分,一些保护剂,易于穿透细胞,避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞,
同时另一些保护剂不能穿透细胞,但可以在冰晶形成之前,优先结合细胞外的水分子,降低细胞外溶液的电解
质浓度,减少阳离子进入细胞的数量。


我公司无血清细胞冻存液,为多种保护剂组合,在细胞内外进行双重保护,大大提高了细胞复苏存活率。




主要成分


无血清细胞冻存液的主要成分:氨基酸,维生素,无机盐,白蛋白,冷冻保护剂。



使用方法


1、细胞冻存前准备

a)要求冻存的细胞在对数生长期,且活率大于90%。
b)计算细胞密度,一般要求密度在1-3x106 cells/mL,不同细胞系请参照附表。 


细胞系

冻存密度
备注

正常人成纤维细胞

1-3x10cells/mL
杂交瘤细胞1-3x106 cells/mL

某些hybridoma会因冷冻浓度太高

而在解冻24小时后死去。

贴壁肿瘤细胞

5-7x106 cells/mLHela除外, 1~3×106cells/ml即可

其他悬浮细胞

5-10x106 cells/mL人淋巴细胞高密度冻存效果好

干细胞类

1-2x107 cells/mL支持高密度冻存MSC细胞,为常规血清冻存液的10倍。


2、细胞冻存过程

用无血清细胞冻存液冻存细胞过程.jpg

a)将要冻存的细胞悬液,进行细胞计数,计数后离心,800转,3min即可。
b)弃去上清,将4度保存的无血清冻存液缓慢加入离心后的细胞沉淀中,根据密度调整细胞冻存液用量。
c)反复吹吸混匀后,分装于细胞冻存管中,每管500ul-1000ul(建议500ul/管)。
d)将分装好的细胞冻存管,直接置于-80度冰箱过夜保存,次日投入液氮中保存即可。


特别提醒:


1.冻存过程中,第2步和第3步在冰袋附近操作时,低温避免保护剂对细胞造成损伤。
2.细胞冻存管一定要保证完全密封,否则在复苏过程中有可能会炸裂。



3、细胞复苏过程

复苏冻存细胞的过程.jpg

a)提前开启水浴锅,温度调节到37度。
b)将冻存的细胞冷冻管从液氮中取出,迅速置于水浴锅中,尽量1min内融化,时间越短对细胞影响越小。
c)将融化后的含细胞的冷冻保存液迅速析出置于新鲜培养基中充分混匀(如细胞冷冻保存液为500ul,则
加入到5ml新鲜培养基中,如细胞冷冻保存液位1ml,则加入10ml新鲜培养基中。)
d)混匀后立即离心,800转,3min即可,离心结束后弃上清,加入预温的新鲜培养液。
e)混匀后分瓶置于二氧化碳培养箱中培养。(二氧化碳浓度根据培养基要求决定,通常为5%)


免疫细胞冻存时间与复苏活率对照表

免疫细胞冻存时间与复苏活率对照表.jpg


MSC细胞冻存时间与复苏活率对照表

MSC细胞冻存时间与复苏活率对照表.jpg


无血清细胞冻存液与含血清细胞冻存细胞复苏对比

无血清细胞冻存液冻存MSC细胞.jpg

无血清细胞冻存液冻存MK2细胞.jpg

无血清细胞冻存液冻存单个核细胞.jpg

无血清细胞冻存液冻存A549细胞.jpg

无血清细胞冻存液冻存杂交瘤细胞.jpg

 无血清细胞冻存液冻存3T3细胞.jpg 

无血清细胞冻存液冻存HEPG2细胞.jpg

无血清细胞冻存液冻存MDCK细胞.jpg


涉及专利:

一种无血清细胞冻存液专利号:ZL201710484789.6

产品优势

支持高密度冻存

间充质干细胞冻存密度上限达2e7 cells/mL,免疫类细胞冻存密度上限达3e7 cells/mL

冻存性能稳定

双重冷冻保护剂配方,细胞复苏活率与回收率稳定在90%以上

操作简便

冻存复苏操作简便,无需程序降温

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